总氮实验步骤
一、试剂：
1、碱性过硫酸钾：称取40.0gK2S2O8溶于600mL水中（可放于50℃水浴加热至完全溶解）；另取15.0gNaOH溶于300mL水中，冷却至室温。混合两溶液定容至1000mL，存放于聚乙烯瓶中。
2、硝酸钾标准贮存液：称取0.7281gKNO3溶于水中，移至1000mL容量瓶中定容混匀，加入1~2mL三氯甲烷作为保护剂。此溶液的ρ（N）=100mg/L。
3、硝酸钾标准使用液：取10.00mL硝酸钾标准贮备液至100mL容量瓶中，稀释至标线混匀，临用现配。此溶液的ρ（N）=10mg/L。
二、标准曲线配置
编号 | 01 | 02 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 |
标准使用液体积（mL） | 0.00 | 0.00 | 0.20 | 0.50 | 1.00 | 2.00 | 3.00 | 5.00 | 7.00 |
加水稀释 | 至10.0mL标线 | ||||||||
加入碱性过硫酸钾体积（mL） | 5.0 | 5.0 | 5.0 | 5.0 | 5.0 | 5.0 | 5.0 | 5.0 | 5.0 |
塞紧瓶塞，用纱布和线绳扎紧，放入高压蒸汽锅中加热至124℃左右，保持温度在120~124℃之间50~55min，自然冷却，取出比色管后将管内液体颠倒混匀2~3次。 | |||||||||
加入HCl（1+9）体积（mL） | 1.0 | 1.0 | 1.0 | 1.0 | 1.0 | 1.0 | 1.0 | 1.0 | 1.0 |
加水稀释 | 至25.0mL标线 | ||||||||
在220nm和275nm处比色（石英比色皿） | |||||||||
三、样品测定
取10.0mL试样于比色管中，按标线步骤测定。
遇到浓度高的试样可以根据情况稀释。
四、现用的标准曲线
编号 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 |
标准加入体积（mL） | 0.20 | 0.50 | 1.00 | 2.00 | 3.00 | 5.00 | 7.00 |
标准加入量 | 0.20 | 0.50 | 1.00 | 2.00 | 3.00 | 5.00 | 7.00 |
吸光度220nm | 0.060 | 0.090 | 0.143 | 0.254 | 0.434 | 0.584 | 0.778 |
吸光度275nm | 0.003 | 0.005 | 0.004 | 0.003 | 0.005 | 0.007 | 0.008 |
A220-2A275 | 0.054 | 0.080 | 0.135 | 0.248 | 0.334 | 0.570 | 0.762 |
减空白吸光度（ΔA） | 0.029 | 0.055 | 0.110 | 0.223 | 0.309 | 0.545 | 0.737 |
回归线方程及相关系数 | Y=0.105X+5.59×10-3 r=0.999 | ||||||
